Hrogēnas metodes pielietošana baktēriju endotoksīnu testā

Hromogēnā metode ir viena no trim metodēm, kas ietver arī gēla recekļa metodi un duļķainuma metodi, lai noteiktu vai kvantitatīvi noteiktu endotoksīnus no gramnegatīvām baktērijām, izmantojot amoebocītu lizātu, kas ekstrahēts no pakava krabja (Limulus polyphemus vai Tachypleus tridentatus) zilajām asinīm.To var klasificēt kā galapunkta hromogēno testu vai kinētiski hromogēno testu, pamatojoties uz konkrēto izmantoto testa principu.

Reakcijas princips ir šāds: amebocītu lizāts satur serīna proteāzes enzīmu (proenzīmu) kaskādi, ko var aktivizēt baktēriju endotoksīni.Endotoksīni aktivizē proenzīmus, lai ražotu aktivētus enzīmus (sauktu par koagulāzi), pēdējais katalizē bezkrāsainā substrāta sadalīšanos, atbrīvojot dzeltenas krāsas produktu pNA.Atbrīvoto pNA var izmērīt fotometriski pie 405 nm.Un absorbcija ir pozitīvi korelē ar endotoksīna koncentrāciju, tad endotoksīna koncentrāciju varētu attiecīgi kvantitatīvi noteikt.


Publicēšanas laiks: 29. septembris — 2019